Análise de rotavírus: diagnóstico da diarréia por rotavírus

O rotavírus é uma doença contagiosa, que é específico do agente causador – ротавирусом. Título traduzido do latim significa "vírus em forma de roda". O outro nome da doença intestinal gripe. O diagnóstico da infecção fácil é colocado através de um laboratório de pesquisa de fezes. O exame por rotavírus pode ser em qualquer laboratório. Existem diferentes técnicas para a sua detecção.

O rotavírus é dado através de mãos sujas pela rota fecal-oral. Sem dificuldades você pode encontrar em fezes de crianças. Se exclusivamente no epitélio intestinal. Fonte de infecção – o homem.

Clínico-método de diagnóstico

O diagnóstico da diarréia por rotavírus colocar por sintomas não é possível. Só se pode especular sobre o desenvolvimento desta doença. Na definição e desenvolvimento de qualquer doença contagiosa é importante a coleta de anamnese (questionário). O seu médico tem de descobrir detalhes de como se desenvolveu a doença da criança:

  • quando os pais pela primeira vez reparou o estado de deterioração da criança;
  • quais foram os primeiros sintomas, etiologia – afiada o início ou o desenvolvimento gradual;
  • descobrir a provável fonte de infecção, o mecanismo de infecção e vias de transmissão de infecção.

A correcta recolha de dados epidemiológicos irá assumir a gênese e o desenvolvimento de infecção.

Características típicas de rotavírus:

  • em 95% dos casos de doentes crianças de 6 meses a 2 anos;
  • o período de incubação de até 4 dias;
  • o início da doença – serviço de vômitos e febre
  • em seguida, desenvolve-se muito líquido, fezes aquosas;
  • nas fezes nunca, consulte as impurezas do sangue.

As regras da amostra de fezes para ротавирусную infecção

Para os resultados do estudo foram os mais verdadeiros, você deve coletar каловые massa seguindo certas regras. Junto dos lactentes cal no rotavírus são colhidas a partir de fralda após o esvaziamento do intestino.

Se a criança já goza de um vaso, antes de assentar a criança, é necessário realizar a desinfecção. Para isso, o pote de обдают água fervente várias vezes. Em suas paredes não deve permanecer em traços sintéticos, produtos de limpeza e обеззараживающих de fundos.

A cal é necessário montar imediatamente após a defecação limpo com uma espátula, se a cadeira de líquido, você pode simplesmente despejar o conteúdo da panela em um recipiente para o envio ao laboratório. A quantidade total de fezes de massa não deve ultrapassar 20 a 30 мл. Recipiente de material biológico deve encaixar-a fechar a tampa.

Para estudar a necessidade de tirar a parte de fezes, que contém patológicos de impurezas muco, фибриновые filme, pus, suspeitos de partículas. Quanto mais rápido a recolher o exame de fezes rotavírus e enviá-lo para o laboratório, a mais válida será o resultado.

Métodos de pesquisa fecal no rotavírus

Ротавирусную diagnosticam a infecção de várias maneiras. Seu objetivo é a definição do próprio vírus, antígenos para ele, a detecção de RNA viral. Sorológico métodos permitem fazer um diagnóstico preciso por um dia.

РЛА – reação de látex-aglutinação de

Este é o tipo de серологической diagnóstico, que é amplamente aplicado em doenças infecciosas. Baseia-se na reação antígeno-anticorpo. Para isso, aplicam especial antígeno, que é representado взвесью microorganismos sensíveis de glóbulos vermelhos e de partículas de látex. Durante a interação de partículas com um anticorpo é formado o complexo, que cai no sedimento, o que indica a presença de rotavírus.

ELISA – os ensaios imunoenzimáticos

A análise sobre a reação antígeno-anticorpo é composto de duas fases. Ocorre primeiro ферментативная reação e, de seguida, a resposta imune. O princípio do método de ligação do anticorpo com o antígeno.

Em um dispositivo dedicado сорбируются anticorpos. Em seguida, com eles se ligam a antígenos alvo. Isso tudo é lavado com uma solução. Em seguida, são aplicadas anticorpos marcados específico da enzima. Fazem uma lavagem. É formada por um complexo antígeno e dois anticorpos. Em seguida, o conteúdo pintada. Quanto mais intensiva a cor na amostra, quanto maior o número de rotavírus está nas fezes.

Иммуноэлектронная microscopia

Esta é uma reação de neutralização do vírus, que é realizada para a identificação, bem como para серологической diagnóstico de infecções virais. O princípio deste teste é baseado no desenvolvimento em corpo de respostas imunes a infecção.

Para avaliar as respostas celulares passam os testes de toxicidade celular de linfócitos relação a agentes infecciosos. Determinam a capacidade de linfócitos na reação. Assim, são identificados anticorpos antivirais. A reação é feito através da mistura de um vírus desconhecido com антисывороткой.

Outros métodos de detecção de rotavírus

A escolha dos métodos de diagnóstico depende de cada caso específico. Para um laboratório de pesquisa de tirar fezes e sangue. As principais maneiras de determinar o diagnóstico de infecção:

  • РДП – reação difusa преципитации.
  • Твердообразная reação коагглютинации.
  • RPG – reação passiva de aglutinação.
  • Иммунофлюоресцентный análise.
  • Радиоиммуный análise.
  • O isolamento do vírus em cultura de células.
  • PCR – reação em cadeia da polimerase.
  • Eletroforese de rotavírus RNA.
  • O método de dispersão de hibridação.
  • РТГА – reação de frenagem гемагглютинации.
  • РНГА – reação indiretaгемагглютинации.

Diagnóstico diferencial

Diferencial teste ротавирусную infecção passam aos pacientes que possuem diferentes agudas intestinais, infecções (bacterianas e virais). Tal diagnóstico é mostrado quando симптоматике à tona sintomas de gastroenterite:

  • alimentos токсикоинфекции;
  • a cólera;
  • a disenteria aguda;
  • diarréia viral – vírus, астровирус, os enterovírus ЕСНО e coxsackie vírus norfolk;
  • infecção por salmonela;
  • эшерихиоз.

A definição de diarréia por rotavírus em casa

Se você precisa fazer urgente uma análise ou diagnóstico de forma independente (no caso, o estado da criança é satisfatório e não requer hospitalização), fazendo um teste de rotavírus em casa. Ele não é trabalhoso e requer o mínimo de tempo. Com a sua ajuda pode ser de 100% para determinar a presença de micro-organismo patogênico nas fezes.

Teste de fluxo lateral teste rápido de rotavírus é baseada na aplicação de anticorpos monoclonais e policlonais murino de anticorpos contra o antígeno viral. Os anticorpos ligados com corante e estão localizados na membrana de teste de gaveta. O teste tem um alto grau de especificidade e sensibilidade.

O que está incluído no teste do sistema:

  • compartimento para o teste – 20 шт.;
  • descartáveis pipeta – 20 шт.;
  • de plástico, um tubo de ensaio contendo 2 ml com um extrator, de 20 шт.;
  • aplicadores para colheita de material – 20 шт.;
  • instruções de utilização do sistema de teste.

Não é possível usar o sistema, se quebrado a integridade da embalagem, ou a data de validade. Durante o teste de usar luvas descartáveis.

Fezes para a pesquisa é tomada somente após a manifestação dos sintomas da doença. Mais precisos os resultados do estudo são de 3 a 5 dias da doença.

Cozinhar экстрагированной experimentação: abrir tubo de ensaio de plástico e com a ajuda de um aplicador de trazer fezes do tamanho de uma ervilha e, em seguida, cubra bem e agitar até completa dissolução do cala a экстрагенте. Em seguida, o tubo de ensaio deve estabelecer-se antes de tempo, até que as partículas maiores não vai assentar no fundo. Para a realização do teste reagente deve estar em temperatura ambiente.

Como é realizado o teste: tirar a embalagem de uma fita cassete abrir o tubo de ensaio com a matéria biológico. Com a ajuda de uma pipeta no buraco para experimentações gota de 6 cheias de gotas, gradualmente, dando, para absorver cada anterior, gota a gota. O tempo máximo, o quanto está se preparando para o resultado, é de 10 minutos.

Resultado da avaliação:

  • uma barra na área de área de controle (C) – resultado negativo, calorias, não contém rotavírus;
  • uma colorida no controle de zona e uma barra (claramente различимая) no teste de zona e o resultado é positivo, na experimentação contém rotavírus;
  • se no controle de zona falta tira – teste não especificado, é defeituosa, com as instruções, é necessário realizar a análise utilizando o outro teste de gaveta.

O teste apenas é adequado para a definição de rotavírus nas fezes. Se nas fezes contêm sangue, isso pode dar um resultado falso positivo.

A infecção por rotavírus doente 100% da população na infância. O perigo esta patologia é só para bebês e crianças de até 3 anos. Para a criança, ela é perigosa tais complicações, como a forte desidratação e a derrota do sistema nervoso – cólicas, até parar de respirar. Portanto, é importante, oportuna e o diagnóstico preciso rotavírus, sua diferenciação com outras doenças infecciosas.